一、數(shù)據(jù)變化不符合預(yù)期
在測定之前，用戶通常會(huì)根據(jù)參考文獻(xiàn)，或者此前自己實(shí)驗(yàn)室的相關(guān)測定結(jié)果，對(duì)本次測定結(jié)果有一個(gè)預(yù)期變化趨勢。但是，有時(shí)會(huì)出現(xiàn)實(shí)際測定數(shù)據(jù)的變化趨勢不符合預(yù)期的情況。
1.檢查預(yù)期的依據(jù)
從生命科學(xué)研究來看，在預(yù)期的基礎(chǔ)上進(jìn)行研究方案設(shè)計(jì)和準(zhǔn)備樣本。但是這樣的預(yù)期一定要建立在堅(jiān)實(shí)的依據(jù)上。
因此，當(dāng)測定數(shù)據(jù)不符合預(yù)期時(shí)，首先應(yīng)該回顧檢查當(dāng)初提出這樣預(yù)期的依據(jù)是否堅(jiān)實(shí)，不能刻舟求劍。
為什么在提出預(yù)期之后還要做實(shí)驗(yàn)和測定呢？因?yàn)轭A(yù)期只是預(yù)期，并不是事實(shí)。預(yù)期能否成立，還行必須通過實(shí)驗(yàn)來加以驗(yàn)證。
2. 檢查測定數(shù)據(jù)的技術(shù)重復(fù)性和樣本重復(fù)性
先查找技術(shù)重復(fù)性，以及計(jì)算公式和單位，有沒有問題；如果沒有問題，再看樣本重復(fù)性，如實(shí)查找樣本質(zhì)量有沒有問題；如果兩者都沒有問題，那么就必須接受測定結(jié)果，而不是刻舟求劍！此時(shí)要做的是，如何解釋結(jié)果。有時(shí)不符合預(yù)期，反而意味著研究的新意，甚至是新發(fā)現(xiàn)。
3.代謝及其調(diào)控往往是立體和網(wǎng)絡(luò)狀的
尤其值得注意的是，代謝及其調(diào)控往往是立體和多通路的。因此某種處理并不必然導(dǎo)致某個(gè)指標(biāo)發(fā)生顯著變化，包括特定化學(xué)物質(zhì)的處理、轉(zhuǎn)基因和基因敲除等情況。因此，出現(xiàn)預(yù)期之外的結(jié)果是很有可能的。
例如，一個(gè)細(xì)胞中某種成分的含量會(huì)取決于三種平衡：輸入與輸出，合成與降解，游離態(tài)與結(jié)合態(tài)。上述三種平衡中，任何一種平衡的偏離都可能造成該成分含量的變化。當(dāng)然，還存在補(bǔ)償效應(yīng)，該成分含量沒有變化，也不等于三種平衡就一定沒有偏離。何況，參與合成的有多種酶，參與降解的同樣有多種酶，因此該成分含量的變化，就有多種可能造成，存在多種不同的組合。
4.分析密切相關(guān)指標(biāo)的變化
如果選擇了測定系列指標(biāo)，那么由于這些指標(biāo)密切相關(guān)，就可以通過相關(guān)指標(biāo)的變化趨勢是否一致，來判斷該指標(biāo)的變化是否正常，因?yàn)橥瑫r(shí)幾個(gè)相關(guān)指標(biāo)變化都不正常的可能性比較小。另外，其它指標(biāo)的變化能否解釋不符合預(yù)期的這個(gè)指標(biāo)的實(shí)際變化趨勢等。
5.改變分母，重新計(jì)算數(shù)據(jù)
就某種測定指標(biāo)而言，其變化趨勢除了與分子本身的變化趨勢有關(guān)外，還受到分母變化趨勢的很大影響。
原則上，為了準(zhǔn)確反映該指標(biāo)的變化趨勢，應(yīng)該選擇在取樣周期內(nèi)不發(fā)生顯著變化的另一個(gè)指標(biāo)作為分母。如果取樣周期內(nèi)作為分母的指標(biāo)本身變化激烈，就會(huì)顯著改變分子的變化趨勢；如果分母變化不規(guī)律，就會(huì)導(dǎo)致分子變化也缺乏規(guī)律。
常用的分母包括鮮重、干重、可溶性蛋白質(zhì)含量、細(xì)胞數(shù)量和器官與個(gè)體的數(shù)量等等。比較罕見的還要DNA含量等等。有時(shí)候換種分母，重新計(jì)算，分子就會(huì)呈現(xiàn)出某種變化規(guī)律。
值得指出的是，除了考慮分母在取樣周期內(nèi)是否發(fā)生變化外，還需要考慮生理意義。例如，測定酶活性時(shí)常用可溶性蛋白質(zhì)含量作為分母。但是，這是對(duì)生化中酶的比活力概念的誤用，因?yàn)榇颂幱玫氖强扇苄缘鞍踪|(zhì)含量，而不是該種酶蛋白的含量，該種酶蛋白只占粗酶液中可溶性蛋白質(zhì)的很少一部分。如果樣本可溶性蛋白質(zhì)含量不發(fā)生顯著變化還好，如果發(fā)生了顯著變化，就會(huì)導(dǎo)致酶活性變化趨勢發(fā)生顯著改變。更加重要的是，酶的比活力對(duì)于研究酶本身是有意義的，但是對(duì)于某種生物學(xué)現(xiàn)象而言，更加關(guān)注的是該酶的生理功能，此時(shí)用鮮重作為分母，應(yīng)該更能反映該酶在此種生物學(xué)現(xiàn)象中的生理功能。
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