J774A.1小鼠單核巨噬細胞培養(yǎng)方法公司由多名留學歸國博士和生物科技領域精英聯(lián)合創(chuàng)建，坐落于美麗的大都市上海，公司堅守“以客戶為中心、以奮斗者為本"的原則，秉承“創(chuàng)新、共享"的發(fā)展理念，以達到客戶對“產品質量的滿意，技術的滿意，售后服務的滿意 "為目標，確保每一位用戶都能獲得更卓yue的體驗。

傳代方法：細胞*匯合時，倒掉舊液，加入消化液（0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA）2ml消化，顯微鏡下觀察細胞*脫離瓶壁分離成單個細胞后棄掉胰酶，加培養(yǎng)基混勻分瓶，T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml，T75瓶加培養(yǎng)基至20ml，37℃，5%CO2孵箱培養(yǎng)。

培養(yǎng)是生物學和醫(yī)學研究zui常用的手段之一，可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩種。原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取細胞進行培養(yǎng)。由于細胞剛剛從活體組織分離出來，故更接近于生物體內的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段，同時也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。

無菌操作：

1. 用紫外燈照射臺子。

2. 用的器材*滅菌包裝好。

3. 在酒精燈附近操作（不能太靠近）。

4. 帶一次性無菌手套，避免袖子或手上的細菌掉入培養(yǎng)基或細胞內 。

注意事項

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數細胞均 會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常， 請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結果顯示細胞無活 力，請拍下 照片及時和我們聯(lián)系，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。

4. 靜置細胞貼壁后，請將細胞瓶內的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細胞正常培養(yǎng)，待細胞匯合度80%左右時正常傳代。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)，培養(yǎng)瓶內多余的培養(yǎng)基可收集備用，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術部溝通交流，由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

購買注意細節(jié)：

1、先咨詢一下J774A.1小鼠單核巨噬細胞培養(yǎng)方法，所買的細胞是用的什么培養(yǎng)基以及什么血清，先準備好，也用同樣的培養(yǎng)基。

2、必要時索取所買細胞的一些技術資料。

3、要忘了問一些培養(yǎng)所買細胞的一些生長特性，細胞來源，細胞代數，細胞生長快慢大約多少天可以傳代等。